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BaculovirusInsect ExpressionSystem
桿狀病毒-昆蟲表達系統(tǒng)
桿狀病毒-昆蟲表達系統(tǒng)

桿狀病毒表達系統(tǒng)(Baculovirus expression vector system,BEVS),憑借其穩(wěn)定的實驗體系、高表達水平及翻譯后修飾功能而被普遍認可為是一種表達大規(guī)模蛋白的強有力的工具。BEVS可以同時表達多個外源基因,在分泌生物活性蛋白的同時增加產(chǎn)量,還可以提供高活性的重組蛋白,解決在其它體系中無法解決的蛋白活性困難。  

服務優(yōu)勢

高表達水平:能夠實現(xiàn)高水平的蛋白質表達,可達到昆蟲細胞的天然表達水平。

大容量表達載體:桿狀病毒表達載體具有較大的容量,可容納較大的目標蛋白質基因。

蛋白質折疊和修飾能力:桿狀病毒表達系統(tǒng)具有昆蟲細胞的蛋白質折疊和修飾機制,可實現(xiàn)復雜蛋白質的正確折疊和修飾。

翻譯后修飾:昆蟲細胞能夠進行正確的翻譯后修飾,如糖基化和脂負載。

適用于多種昆蟲細胞:桿狀病毒可以感染多種昆蟲細胞,包括昆蟲細胞系和昆蟲體內(nèi)的細胞。

服務內(nèi)容如下
服務項目內(nèi)容交期
全基因合成分析基因序列,優(yōu)化密碼子,合成目的基因,提供載體1-2周
重組質粒的構建選用合適的載體,合適的標簽(eg:His,GST,Fc,SUMO)構建重組供體質?!皃fastbacⅠ-target”(target代表目標基因)1周
重組桿粒的制備轉化重組供體質粒至DH10bac感受態(tài)細胞,藍白斑篩選陽性克隆并使用PCR反復鑒定,最后堿裂解小提重組桿粒1周
細胞轉染復蘇并傳代懸浮培養(yǎng)的SF21細胞,使用化學轉染試劑將重組桿粒轉染入SF21細胞以制備P1代重組桿狀病毒1周
重組蛋白的表達利用P1代桿狀病毒制備P2代病毒、利用P2代病毒侵染大規(guī)模培養(yǎng)的SF21細胞以表達重組蛋白1周
重組蛋白的分離純化及QC檢測選用合適的色譜方法(eg:親和、離子、分子篩等)分離純化重組蛋白,并超濾換液至客戶指定的緩沖液(如無特殊要求最終的保存緩沖液選擇PBS或Tris-HCl)。QC檢測包括:SDS-PAGE電泳檢測重組蛋白純度、BCA定量重組蛋白的濃度、Western-blot檢測1周